 |
ชุดตรวจ PCR สำหรับไวรัสโรคจุดขาว (WSSV) ของกุ้ง (การตรวจด้วย Fluorescent Probe Assays)
ชื่อผลิตภัณฑ์: ชุดตรวจ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับไวรัสกลุ่มอาการจุดขาว
บรรจุุภัณฑ์: 50ชุด/กล่อง
บ่งชี้: ชุดนี้ใช้ได้กับการตรวจหากรดนิวคลีอิกของ DNA ของไวรัสโรคจุดขาวในกุ้งในเนื้อเยื่อของกุ้ง ผลการทดสอบมีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น ไม่ใช่สำหรับการวินิจฉัยทางคลินิก
ส่วนประกอบและเนื้อหาหลัก:
ชื่อ | ข้อมูลจำเพาะ | ปริมาณ |
วิธีแก้ปัญหาปฏิกิริยา WSSV | 1,000µl/หลอด | 1 |
WSSV การควบคุมเชิงบวก | 250µl/หลอด | 1 |
การควบคุมเชิงลบ | 250µl/หลอด | 1 |
การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา:
เก็บไว้ที่ -20±5℃ แช่แข็งและละลายซ้ำ ≤ 3 ครั้ง อายุการเก็บรักษาคือ 12 เดือน
วิธีทดสอบ:
1. การสกัดกรดนิวคลีอิก
ชุดสกัด DNA เชิงพาณิชย์สามารถดำเนินการสกัดกรดนิวคลีอิกได้ โปรดปฏิบัติตามคำแนะนำของชุดเครื่องมือ
2. การขยาย PCR
2.1 คำนวณจำนวนตัวอย่างทดสอบ ใช้หลอดปฏิกิริยา PCR n+2 หลอด และเติมสารละลายปฏิกิริยา 20µl ลงในแต่ละหลอด
2.2 เติมกรดนิวคลีอิก 5µl ของกลุ่มควบคุมเชิงลบ กลุ่มควบคุมเชิงบวก และตัวอย่างลงในหลอดปฏิกิริยา PRC ข้างต้นตามลำดับ หมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที แล้วใส่ลงใน PCR เชิงปริมาณเรืองแสง
2.3 เงื่อนไขการเกิดปฏิกิริยาถูกกำหนดเป็น:
พารามิเตอร์ของการขยาย | |||
ระบบ | ปริมาตรรวมคือ 25µl | ||
การรวบรวมสัญญาณ | สัญญาณเรืองแสง WSSV | ช่อง FAM รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |
สภาวะปฏิกิริยาของ PCR | เฟส | เงื่อนไข | รอบ |
กระบวนการ UNG | 37℃ เป็นเวลา 2 นาที | 1 | |
ก่อนการเสื่อมสภาพ | 95℃ เป็นเวลา 30 วินาที | 1 | |
พีซีอาร์ | 95℃ เป็นเวลา 10 วินาที |
40 | |
60 ℃ เป็นเวลา 30 วินาที กำหนดให้รวบรวมสัญญาณเรืองแสงเมื่อสิ้นสุดเฟสนี้ | |||
ผลการตัดสิน:
1. การตัดสินความถูกต้อง:
1.1 การควบคุมเชิงบวก: ค่า Ct ของช่องสัญญาณ FAM ≤ 32 และเส้นโค้งการขยายมีเฟสการเติบโตแบบทวีคูณที่มีนัยสำคัญ
1.2 การควบคุมเชิงลบ: ช่องสัญญาณ FAM ไม่มีเส้นโค้งการขยายสัญญาณ หรือเส้นโค้งการขยายสัญญาณเป็นเส้นตรงหรือเส้นเฉียงเล็กน้อย ไม่มีเฟสการเติบโตแบบเอกซ์โปเนนเชียลที่มีนัยสำคัญ และค่า Ct ≥ 38 หรือไม่มีค่า Ct
2. การตัดสินผลการทดสอบ:
2.1 หากมีการเติบโตแบบทวีคูณอย่างมีนัยสำคัญในช่อง FAM และค่า Ct ≤35 จะถือว่า WSSV เป็นบวก
2.2 หากมีการเติบโตแบบทวีคูณอย่างมีนัยสำคัญในช่อง FAM และค่า Ct ระหว่าง 35-38 จะถือว่า WSSV น่าสงสัยควรทดสอบตัวอย่างซ้ำๆหากค่า Ct ของผลการทดสอบซ้ำยังคงอยู่ระหว่าง 35-38 โดยมีช่วงการเติบโตแบบทวีคูณที่มีนัยสำคัญ จะถือว่าเป็นค่าบวก มิฉะนั้นจะเป็นค่าลบ
2.3 หากค่า Ct ของผลการทดสอบ FAM > 38 หรือไม่มีค่า Ct แสดงว่าเป็นค่าลบ WSSV
ข้อควรระวัง:
1. การจัดการห้องปฏิบัติการต้องเป็นไปตามข้อกำหนดการจัดการของห้องปฏิบัติการขยายยีน PCR อย่างเคร่งครัดบุคลากรในห้องปฏิบัติการต้องผ่านการฝึกอบรมอย่างมืออาชีพกระบวนการทดลองจะต้องดำเนินการอย่างเคร่งครัดในพื้นที่ต่างๆ (พื้นที่เตรียมรีเอเจนต์ พื้นที่เตรียมชิ้นงานทดสอบ พื้นที่ขยาย และพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์)วัสดุสิ้นเปลืองทั้งหมดจะต้องทิ้งหลังจากการฆ่าเชื้อเครื่องมือพิเศษ อุปกรณ์ และวัสดุสิ้นเปลืองในแต่ละขั้นตอนของการดำเนินการทดลองจะต้องไม่ถูกใช้งานร่วมกัน
2. โปรดเตรียมตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพสำหรับขั้นตอนการเตรียมสารและตัวอย่างควรใช้เสื้อโค้ทสำหรับห้องปฏิบัติการ ถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง และปิเปตเตอร์ในระหว่างการทดลอง
3. ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและการละลายน้ำยาซ้ำ ๆ เท่าที่จะทำได้ก่อนใช้งาน รีเอเจนต์จะต้องละลายให้หมดและหมุนเหวี่ยงที่ 8000rpm เป็นเวลาหลายวินาที
4. โปรดใส่ปิเปตที่ใช้ในพื้นที่เตรียมตัวอย่างลงในภาชนะที่มีสารฆ่าเชื้อและทิ้งพร้อมกับของเสียหลังการฆ่าเชื้อ
5. หลังการทดลอง โต๊ะทำงานและปิเปตเตอร์ได้รับการบำบัดด้วยไฮโปคลอไรต์ 10% หรือแอลกอฮอล์ 75% หรือหลอดอัลตราไวโอเลต
การผลิต:
ชื่อ: มณฑลซานตง Xinda Gene Technology Co., Ltd
บริษัทในเครือของ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
ที่อยู่: อาคาร B2 สวนอุตสาหกรรม Bandaohuigu ถนน Shungeng เมือง Zhucheng มณฑลซานตง
รหัสไปรษณีย์: 262233
โทรศัพท์: +86 - 0532 5882 0810
ชุดตรวจ PCR สำหรับไวรัสโรคจุดขาว (WSSV) ของกุ้ง (การตรวจด้วย Fluorescent Probe Assays)
ชื่อผลิตภัณฑ์: ชุดตรวจ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับไวรัสกลุ่มอาการจุดขาว
บรรจุุภัณฑ์: 50ชุด/กล่อง
บ่งชี้: ชุดนี้ใช้ได้กับการตรวจหากรดนิวคลีอิกของ DNA ของไวรัสโรคจุดขาวในกุ้งในเนื้อเยื่อของกุ้ง ผลการทดสอบมีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น ไม่ใช่สำหรับการวินิจฉัยทางคลินิก
ส่วนประกอบและเนื้อหาหลัก:
ชื่อ | ข้อมูลจำเพาะ | ปริมาณ |
วิธีแก้ปัญหาปฏิกิริยา WSSV | 1,000µl/หลอด | 1 |
WSSV การควบคุมเชิงบวก | 250µl/หลอด | 1 |
การควบคุมเชิงลบ | 250µl/หลอด | 1 |
การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา:
เก็บไว้ที่ -20±5℃ แช่แข็งและละลายซ้ำ ≤ 3 ครั้ง อายุการเก็บรักษาคือ 12 เดือน
วิธีทดสอบ:
1. การสกัดกรดนิวคลีอิก
ชุดสกัด DNA เชิงพาณิชย์สามารถดำเนินการสกัดกรดนิวคลีอิกได้ โปรดปฏิบัติตามคำแนะนำของชุดเครื่องมือ
2. การขยาย PCR
2.1 คำนวณจำนวนตัวอย่างทดสอบ ใช้หลอดปฏิกิริยา PCR n+2 หลอด และเติมสารละลายปฏิกิริยา 20µl ลงในแต่ละหลอด
2.2 เติมกรดนิวคลีอิก 5µl ของกลุ่มควบคุมเชิงลบ กลุ่มควบคุมเชิงบวก และตัวอย่างลงในหลอดปฏิกิริยา PRC ข้างต้นตามลำดับ หมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที แล้วใส่ลงใน PCR เชิงปริมาณเรืองแสง
2.3 เงื่อนไขการเกิดปฏิกิริยาถูกกำหนดเป็น:
พารามิเตอร์ของการขยาย | |||
ระบบ | ปริมาตรรวมคือ 25µl | ||
การรวบรวมสัญญาณ | สัญญาณเรืองแสง WSSV | ช่อง FAM รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |
สภาวะปฏิกิริยาของ PCR | เฟส | เงื่อนไข | รอบ |
กระบวนการ UNG | 37℃ เป็นเวลา 2 นาที | 1 | |
ก่อนการเสื่อมสภาพ | 95℃ เป็นเวลา 30 วินาที | 1 | |
พีซีอาร์ | 95℃ เป็นเวลา 10 วินาที |
40 | |
60 ℃ เป็นเวลา 30 วินาที กำหนดให้รวบรวมสัญญาณเรืองแสงเมื่อสิ้นสุดเฟสนี้ | |||
ผลการตัดสิน:
1. การตัดสินความถูกต้อง:
1.1 การควบคุมเชิงบวก: ค่า Ct ของช่องสัญญาณ FAM ≤ 32 และเส้นโค้งการขยายมีเฟสการเติบโตแบบทวีคูณที่มีนัยสำคัญ
1.2 การควบคุมเชิงลบ: ช่องสัญญาณ FAM ไม่มีเส้นโค้งการขยายสัญญาณ หรือเส้นโค้งการขยายสัญญาณเป็นเส้นตรงหรือเส้นเฉียงเล็กน้อย ไม่มีเฟสการเติบโตแบบเอกซ์โปเนนเชียลที่มีนัยสำคัญ และค่า Ct ≥ 38 หรือไม่มีค่า Ct
2. การตัดสินผลการทดสอบ:
2.1 หากมีการเติบโตแบบทวีคูณอย่างมีนัยสำคัญในช่อง FAM และค่า Ct ≤35 จะถือว่า WSSV เป็นบวก
2.2 หากมีการเติบโตแบบทวีคูณอย่างมีนัยสำคัญในช่อง FAM และค่า Ct ระหว่าง 35-38 จะถือว่า WSSV น่าสงสัยควรทดสอบตัวอย่างซ้ำๆหากค่า Ct ของผลการทดสอบซ้ำยังคงอยู่ระหว่าง 35-38 โดยมีช่วงการเติบโตแบบทวีคูณที่มีนัยสำคัญ จะถือว่าเป็นค่าบวก มิฉะนั้นจะเป็นค่าลบ
2.3 หากค่า Ct ของผลการทดสอบ FAM > 38 หรือไม่มีค่า Ct แสดงว่าเป็นค่าลบ WSSV
ข้อควรระวัง:
1. การจัดการห้องปฏิบัติการต้องเป็นไปตามข้อกำหนดการจัดการของห้องปฏิบัติการขยายยีน PCR อย่างเคร่งครัดบุคลากรในห้องปฏิบัติการต้องผ่านการฝึกอบรมอย่างมืออาชีพกระบวนการทดลองจะต้องดำเนินการอย่างเคร่งครัดในพื้นที่ต่างๆ (พื้นที่เตรียมรีเอเจนต์ พื้นที่เตรียมชิ้นงานทดสอบ พื้นที่ขยาย และพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์)วัสดุสิ้นเปลืองทั้งหมดจะต้องทิ้งหลังจากการฆ่าเชื้อเครื่องมือพิเศษ อุปกรณ์ และวัสดุสิ้นเปลืองในแต่ละขั้นตอนของการดำเนินการทดลองจะต้องไม่ถูกใช้งานร่วมกัน
2. โปรดเตรียมตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพสำหรับขั้นตอนการเตรียมสารและตัวอย่างควรใช้เสื้อโค้ทสำหรับห้องปฏิบัติการ ถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง และปิเปตเตอร์ในระหว่างการทดลอง
3. ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและการละลายน้ำยาซ้ำ ๆ เท่าที่จะทำได้ก่อนใช้งาน รีเอเจนต์จะต้องละลายให้หมดและหมุนเหวี่ยงที่ 8000rpm เป็นเวลาหลายวินาที
4. โปรดใส่ปิเปตที่ใช้ในพื้นที่เตรียมตัวอย่างลงในภาชนะที่มีสารฆ่าเชื้อและทิ้งพร้อมกับของเสียหลังการฆ่าเชื้อ
5. หลังการทดลอง โต๊ะทำงานและปิเปตเตอร์ได้รับการบำบัดด้วยไฮโปคลอไรต์ 10% หรือแอลกอฮอล์ 75% หรือหลอดอัลตราไวโอเลต
การผลิต:
ชื่อ: มณฑลซานตง Xinda Gene Technology Co., Ltd
บริษัทในเครือของ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
ที่อยู่: อาคาร B2 สวนอุตสาหกรรม Bandaohuigu ถนน Shungeng เมือง Zhucheng มณฑลซานตง
รหัสไปรษณีย์: 262233
โทรศัพท์: +86 - 0532 5882 0810
