สถานะห้องว่าง: | |
---|---|
ชุดตรวจ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับไวรัสไข้สุกรแอฟริกัน (MGF/CD2V/VP72)
【ชื่อผลิตภัณฑ์】
ชุดตรวจ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับไวรัสไข้สุกรแอฟริกัน (MGF/CD2V/VP72)
【บรรจุุภัณฑ์】
50ชุด/กล่อง
【ส่วนประกอบและเนื้อหาหลัก】
ชื่อ | ข้อมูลจำเพาะ | ปริมาณ |
โซลูชันปฏิกิริยา ASFV (MGF/CD2V/VP72) | 1,000µl/หลอด | 1 |
ASFV (MGF/CD2V/VP72) การควบคุมเชิงบวก | 250µl/หลอด | 1 |
การควบคุมเชิงลบ | 250µl/หลอด | 1 |
【การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา】
เก็บไว้ที่ -20±5℃
,แช่แข็งและละลายซ้ำ ≤ 3 ครั้ง อายุการเก็บรักษา 12 เดือน
【วิธีทดสอบ】
1. การสกัดกรดนิวคลีอิก
ชุดสกัด DNA เชิงพาณิชย์สามารถดำเนินการสกัดกรดนิวคลีอิกได้ โปรดปฏิบัติตามคำแนะนำของชุดเครื่องมือ
2. การขยาย PCR
2.1 คำนวณจำนวนตัวอย่างทดสอบ ใช้หลอดปฏิกิริยา PCR n+2 หลอด และเติมสารละลายปฏิกิริยา 20µl ลงในแต่ละหลอด
2.2 เพิ่ม 5µl l กรดนิวคลีอิกของการควบคุมเชิงลบ การควบคุมเชิงบวก และตัวอย่างลงในหลอดปฏิกิริยา PCR ข้างต้นตามลำดับ หมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที แล้วใส่ลงในเครื่องขยายสัญญาณ PCR เชิงปริมาณเรืองแสง
2.3 เงื่อนไขการเกิดปฏิกิริยาถูกกำหนดดังนี้:
พารามิเตอร์ที่เกี่ยวข้องของเครื่องขยายเสียง | |||
ระบบ | ปริมาตรรวม: 30µl | ||
การรวบรวมสัญญาณ
| ASFV (MGF/CD2V/VP72) สัญญาณเรืองแสง
| ช่อง VP72-FAM รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |
ช่อง CD2V-VIC/HEX รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |||
ช่อง MGF-CY5 รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |||
สภาวะการเกิดปฏิกิริยา PCR
| เวที | Condition | หมายเลขไซเคิล |
การประมวลผล UNG | 37℃: 2 นาที | 1 | |
การเสื่อมสภาพ | 95 ℃: 30 วินาที | 1 | |
พีซีอาร์
| 95 ℃: 10 วินาที |
40
| |
56℃: 30 วินาที (ตั้งค่าเพื่อรวบรวมสัญญาณเรืองแสงเมื่อสิ้นสุดขั้นตอนนี้) |
【การตีความผลลัพธ์】
1. การพิจารณาประสิทธิภาพของชุดทดสอบ :
(1) การควบคุมเชิงบวก: ค่า Ct ของช่องสัญญาณ FAM, HEX/VIC และ CY5 ≤ 32, เส้นโค้งการขยายที่มีเฟสเอ็กซ์โปเนนเชียลชัดเจน
(2) การควบคุมเชิงลบ: ช่อง FAM, HEX/VIC และ CY5 ไม่มีเส้นโค้งการขยายหรือเส้นโค้งการขยายเป็นเส้นตรงหรือเฉียงเล็กน้อย ไม่มีเฟสเอกซ์โปเนนเชียลที่สำคัญ และค่า Ct ≥ 38 หรือไม่มีค่า Ct
2. การตัดสินผลลัพธ์:
ผลการตัดสิน | ช่องแฟม | ช่อง HEX/VIC | ช่อง CY5 |
VP72 ASFV กรดนิวคลีอิกเป็นบวก | + | - | - |
กรดนิวคลีอิก CD2V ASFV เป็นบวก | - | + | - |
MGF ASFV กรดนิวคลีอิกเป็นบวก | - | - | + |
กรดนิวคลีอิก VP72 และ CD2V ASFV เป็นบวก | + | + | - |
กรดนิวคลีอิก VP72 และ MGF ASFV เป็นบวก | + | - | + |
กรดนิวคลีอิก CD2V และ MGF ASFV เป็นบวก | - | + | + |
MGF, CD2V และ VP72 ASFV กรดนิวคลีอิกเป็นบวก | + | + | + |
MGF, CD2V และ VP72 ASFV กรดนิวคลีอิกเป็นลบ | - | - | - |
*บันทึก:
(1) หากมีเส้นโค้งการขยายเฟสการเติบโตแบบลอการิทึมและค่า Ct ≤ 35 จะถูกตัดสินว่าเป็น +หากไม่มีเส้นโค้งการขยายหรือค่า Ct > 38 จะตัดสินเป็น -ตัวอย่างมีค่าน่าสงสัยเมื่อ 35 < ค่า Ct < 38 ซึ่งต้องทำการทดสอบซ้ำหากค่า Ct ของผลลัพธ์ที่ทดสอบซ้ำยังคงอยู่ระหว่าง 35-38 โดยมีช่วงการเติบโตแบบลอการิทึมที่ชัดเจน จะตัดสินว่าเป็นค่าบวก หรือมิฉะนั้นจะเป็นค่าลบ
【ข้อควรระวัง】
1. การจัดการห้องปฏิบัติการต้องเป็นไปตามข้อกำหนดการจัดการของห้องปฏิบัติการขยายยีน PCR อย่างเคร่งครัดบุคลากรในห้องปฏิบัติการต้องผ่านการฝึกอบรมอย่างมืออาชีพกระบวนการทดลองจะต้องดำเนินการอย่างเคร่งครัดในพื้นที่ต่างๆ (พื้นที่เตรียมรีเอเจนต์ พื้นที่เตรียมชิ้นงานทดสอบ พื้นที่ขยาย และพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์)วัสดุสิ้นเปลืองทั้งหมดจะต้องทิ้งหลังจากการฆ่าเชื้อเครื่องมือพิเศษ อุปกรณ์ และวัสดุสิ้นเปลืองในแต่ละขั้นตอนของการดำเนินการทดลองจะต้องไม่ถูกใช้งานร่วมกัน
2. โปรดเตรียมตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพสำหรับขั้นตอนการเตรียมสารและตัวอย่างควรใช้เสื้อโค้ทสำหรับห้องปฏิบัติการ ถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง และปิเปตเตอร์ในระหว่างการทดลอง
3. ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและการละลายน้ำยาซ้ำ ๆ เท่าที่จะทำได้ก่อนใช้งาน รีเอเจนต์จะต้องละลายให้หมดและหมุนเหวี่ยงที่ 8000rpm เป็นเวลาหลายวินาที
4. โปรดใส่ปิเปตที่ใช้ในพื้นที่เตรียมตัวอย่างลงในภาชนะที่มีสารฆ่าเชื้อและทิ้งพร้อมกับของเสียหลังการฆ่าเชื้อ
5. หลังการทดลอง โต๊ะทำงานและปิเปตเตอร์ได้รับการบำบัดด้วยไฮโปคลอไรต์ 10% หรือแอลกอฮอล์ 75% หรือหลอดอัลตราไวโอเลต
【การผลิต】
ชื่อ: มณฑลซานตง Xinda Gene Technology Co., Ltd
บริษัทในเครือของ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
ที่อยู่: อาคาร B2 สวนอุตสาหกรรม Bandaohuigu ถนน Shungeng เมือง Zhucheng มณฑลซานตง
รหัสไปรษณีย์: 262233
โทรศัพท์: +86 - 0532 5882 0810
ชุดตรวจ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับไวรัสไข้สุกรแอฟริกัน (MGF/CD2V/VP72)
【ชื่อผลิตภัณฑ์】
ชุดตรวจ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับไวรัสไข้สุกรแอฟริกัน (MGF/CD2V/VP72)
【บรรจุุภัณฑ์】
50ชุด/กล่อง
【ส่วนประกอบและเนื้อหาหลัก】
ชื่อ | ข้อมูลจำเพาะ | ปริมาณ |
โซลูชันปฏิกิริยา ASFV (MGF/CD2V/VP72) | 1,000µl/หลอด | 1 |
ASFV (MGF/CD2V/VP72) การควบคุมเชิงบวก | 250µl/หลอด | 1 |
การควบคุมเชิงลบ | 250µl/หลอด | 1 |
【การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา】
เก็บไว้ที่ -20±5℃
,แช่แข็งและละลายซ้ำ ≤ 3 ครั้ง อายุการเก็บรักษา 12 เดือน
【วิธีทดสอบ】
1. การสกัดกรดนิวคลีอิก
ชุดสกัด DNA เชิงพาณิชย์สามารถดำเนินการสกัดกรดนิวคลีอิกได้ โปรดปฏิบัติตามคำแนะนำของชุดเครื่องมือ
2. การขยาย PCR
2.1 คำนวณจำนวนตัวอย่างทดสอบ ใช้หลอดปฏิกิริยา PCR n+2 หลอด และเติมสารละลายปฏิกิริยา 20µl ลงในแต่ละหลอด
2.2 เพิ่ม 5µl l กรดนิวคลีอิกของการควบคุมเชิงลบ การควบคุมเชิงบวก และตัวอย่างลงในหลอดปฏิกิริยา PCR ข้างต้นตามลำดับ หมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที แล้วใส่ลงในเครื่องขยายสัญญาณ PCR เชิงปริมาณเรืองแสง
2.3 เงื่อนไขการเกิดปฏิกิริยาถูกกำหนดดังนี้:
พารามิเตอร์ที่เกี่ยวข้องของเครื่องขยายเสียง | |||
ระบบ | ปริมาตรรวม: 30µl | ||
การรวบรวมสัญญาณ
| ASFV (MGF/CD2V/VP72) สัญญาณเรืองแสง
| ช่อง VP72-FAM รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |
ช่อง CD2V-VIC/HEX รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |||
ช่อง MGF-CY5 รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |||
สภาวะการเกิดปฏิกิริยา PCR
| เวที | Condition | หมายเลขไซเคิล |
การประมวลผล UNG | 37℃: 2 นาที | 1 | |
การเสื่อมสภาพ | 95 ℃: 30 วินาที | 1 | |
พีซีอาร์
| 95 ℃: 10 วินาที |
40
| |
56℃: 30 วินาที (ตั้งค่าเพื่อรวบรวมสัญญาณเรืองแสงเมื่อสิ้นสุดขั้นตอนนี้) |
【การตีความผลลัพธ์】
1. การพิจารณาประสิทธิภาพของชุดทดสอบ :
(1) การควบคุมเชิงบวก: ค่า Ct ของช่องสัญญาณ FAM, HEX/VIC และ CY5 ≤ 32, เส้นโค้งการขยายที่มีเฟสเอ็กซ์โปเนนเชียลชัดเจน
(2) การควบคุมเชิงลบ: ช่อง FAM, HEX/VIC และ CY5 ไม่มีเส้นโค้งการขยายหรือเส้นโค้งการขยายเป็นเส้นตรงหรือเฉียงเล็กน้อย ไม่มีเฟสเอกซ์โปเนนเชียลที่สำคัญ และค่า Ct ≥ 38 หรือไม่มีค่า Ct
2. การตัดสินผลลัพธ์:
ผลการตัดสิน | ช่องแฟม | ช่อง HEX/VIC | ช่อง CY5 |
VP72 ASFV กรดนิวคลีอิกเป็นบวก | + | - | - |
กรดนิวคลีอิก CD2V ASFV เป็นบวก | - | + | - |
MGF ASFV กรดนิวคลีอิกเป็นบวก | - | - | + |
กรดนิวคลีอิก VP72 และ CD2V ASFV เป็นบวก | + | + | - |
กรดนิวคลีอิก VP72 และ MGF ASFV เป็นบวก | + | - | + |
กรดนิวคลีอิก CD2V และ MGF ASFV เป็นบวก | - | + | + |
MGF, CD2V และ VP72 ASFV กรดนิวคลีอิกเป็นบวก | + | + | + |
MGF, CD2V และ VP72 ASFV กรดนิวคลีอิกเป็นลบ | - | - | - |
*บันทึก:
(1) หากมีเส้นโค้งการขยายเฟสการเติบโตแบบลอการิทึมและค่า Ct ≤ 35 จะถูกตัดสินว่าเป็น +หากไม่มีเส้นโค้งการขยายหรือค่า Ct > 38 จะตัดสินเป็น -ตัวอย่างมีค่าน่าสงสัยเมื่อ 35 < ค่า Ct < 38 ซึ่งต้องทำการทดสอบซ้ำหากค่า Ct ของผลลัพธ์ที่ทดสอบซ้ำยังคงอยู่ระหว่าง 35-38 โดยมีช่วงการเติบโตแบบลอการิทึมที่ชัดเจน จะตัดสินว่าเป็นค่าบวก หรือมิฉะนั้นจะเป็นค่าลบ
【ข้อควรระวัง】
1. การจัดการห้องปฏิบัติการต้องเป็นไปตามข้อกำหนดการจัดการของห้องปฏิบัติการขยายยีน PCR อย่างเคร่งครัดบุคลากรในห้องปฏิบัติการต้องผ่านการฝึกอบรมอย่างมืออาชีพกระบวนการทดลองจะต้องดำเนินการอย่างเคร่งครัดในพื้นที่ต่างๆ (พื้นที่เตรียมรีเอเจนต์ พื้นที่เตรียมชิ้นงานทดสอบ พื้นที่ขยาย และพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์)วัสดุสิ้นเปลืองทั้งหมดจะต้องทิ้งหลังจากการฆ่าเชื้อเครื่องมือพิเศษ อุปกรณ์ และวัสดุสิ้นเปลืองในแต่ละขั้นตอนของการดำเนินการทดลองจะต้องไม่ถูกใช้งานร่วมกัน
2. โปรดเตรียมตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพสำหรับขั้นตอนการเตรียมสารและตัวอย่างควรใช้เสื้อโค้ทสำหรับห้องปฏิบัติการ ถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง และปิเปตเตอร์ในระหว่างการทดลอง
3. ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและการละลายน้ำยาซ้ำ ๆ เท่าที่จะทำได้ก่อนใช้งาน รีเอเจนต์จะต้องละลายให้หมดและหมุนเหวี่ยงที่ 8000rpm เป็นเวลาหลายวินาที
4. โปรดใส่ปิเปตที่ใช้ในพื้นที่เตรียมตัวอย่างลงในภาชนะที่มีสารฆ่าเชื้อและทิ้งพร้อมกับของเสียหลังการฆ่าเชื้อ
5. หลังการทดลอง โต๊ะทำงานและปิเปตเตอร์ได้รับการบำบัดด้วยไฮโปคลอไรต์ 10% หรือแอลกอฮอล์ 75% หรือหลอดอัลตราไวโอเลต
【การผลิต】
ชื่อ: มณฑลซานตง Xinda Gene Technology Co., Ltd
บริษัทในเครือของ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
ที่อยู่: อาคาร B2 สวนอุตสาหกรรม Bandaohuigu ถนน Shungeng เมือง Zhucheng มณฑลซานตง
รหัสไปรษณีย์: 262233
โทรศัพท์: +86 - 0532 5882 0810