สถานะห้องว่าง: | |
---|---|
ชุดตรวจจับไวรัสไข้หวัดนก H5/H7/H9/RNA ชนิดย่อยทั่วไป (PCR-Fluorescence Probing)
【ชื่อผลิตภัณฑ์】
ชุดตรวจ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับไวรัสไข้หวัดนก H5/H7/H9/ชนิดย่อยทั่วไป
【บรรจุุภัณฑ์】
50ชุด/กล่อง
【ส่วนประกอบและเนื้อหาหลัก】
ชื่อ | ข้อมูลจำเพาะ | ปริมาณ |
H5/H7/H9/สารละลายปฏิกิริยาไตรวาเลนท์ทั่วไป | 1250µl/หลอด | 1 |
H5/H7/H9/การควบคุมเชิงบวกทั่วไป | 250µl/หลอด | 1 |
การควบคุมเชิงลบ | 250µl/หลอด | 1 |
【การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา】
เก็บไว้ที่ -20±5℃ แช่แข็งและละลายซ้ำ ≤ 3 ครั้ง อายุการเก็บรักษาคือ 12 เดือน
【แบบอย่าง】
ABI 7500, ABI QuantStudio 5, CFX Connect, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentiter 96E/96R, LineGene 9600 Plus และเครื่องขยายสัญญาณ PCR เชิงปริมาณเรืองแสงอื่นๆ
【วิธีทดสอบ】
1. การสกัดกรดนิวคลีอิก
ชุดสกัด RNA เชิงพาณิชย์สามารถใช้สำหรับการสกัดกรดนิวคลีอิกได้ โปรดปฏิบัติตามคำแนะนำของชุดเครื่องมือ
2. การขยาย PCR
2.1 คำนวณจำนวนตัวอย่างทดสอบ ใช้หลอดปฏิกิริยา PCR n+2 หลอด และเติมสารละลายปฏิกิริยา 25µl ลงในแต่ละหลอด
2.2 เพิ่ม 5µl กรดนิวคลีอิกของการควบคุมเชิงลบ การควบคุมเชิงบวก และตัวอย่างลงในหลอดปฏิกิริยา PCR ข้างต้นตามลำดับ หมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที แล้วใส่ลงในเครื่องขยายสัญญาณ PCR เชิงปริมาณเรืองแสง
2.3 เงื่อนไขการเกิดปฏิกิริยาถูกกำหนดดังนี้:
พารามิเตอร์ที่เกี่ยวข้องของเครื่องขยายเสียง | |||
ระบบ | ปริมาตรรวม: 30µl | ||
การรวบรวมสัญญาณ
| โรคไข้หวัดนก H5/H7/H9/ทั่วไป
| ประเภทย่อย H5 - ช่อง HEX รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |
ประเภทย่อย H7 - ช่อง FAM รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |||
ประเภทย่อย H9 - ช่อง Cy5 รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |||
ทั่วไป - ช่อง ROX รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |||
สภาวะการเกิดปฏิกิริยา PCR
| เวที | Condition | หมายเลขไซเคิล |
การถอดความแบบย้อนกลับ | 55℃: 15 นาที | 1 | |
การเสื่อมสภาพ | 95 ℃: 30 วินาที | 1 | |
พีซีอาร์
| 95 ℃: 10 วินาที |
40
| |
56℃: 30 วินาที (ตั้งค่าเพื่อรวบรวมสัญญาณเรืองแสงเมื่อสิ้นสุดขั้นตอนนี้) |
【การตีความผลลัพธ์】
1. การพิจารณาประสิทธิภาพของชุดทดสอบ :
(1) การควบคุมเชิงบวกที่อ่อนแอ: ค่า Ct ของช่อง FAM, HEX, Cy5 และ ROX ≤ 32, เส้นโค้งการขยายที่มีเฟสเอ็กซ์โปเนนเชียลที่ชัดเจน
(2) การควบคุมเปล่า: ช่องสัญญาณ FAM, HEX, Cy5 และ ROX ไม่มีเส้นโค้งการขยายหรือเส้นโค้งการขยายเป็นเส้นตรงหรือเฉียงเล็กน้อย ไม่มีเฟสเอกซ์โปเนนเชียลที่สำคัญ และค่า Ct ≥ 38 หรือไม่มีค่า Ct
2. การตัดสินผลลัพธ์:
ผลการตัดสิน | ช่องแฟม | ช่อง HEX | ช่อง Cy5 | ช่อง ROX |
ไวรัสไข้หวัดนกชนิดย่อย H5 กรดนิวคลีอิกเป็นบวก | - | + | - | + |
ไวรัสไข้หวัดนกชนิดย่อย H7 กรดนิวคลีอิกเป็นบวก | + | - | - | + |
ไวรัสไข้หวัดนก ชนิดย่อย H9 กรดนิวคลีอิกเป็นบวก | - | - | + | + |
ไวรัสไข้หวัดนก H5/H7 ชนิดย่อยของกรดนิวคลีอิกเป็นบวก | + | + | - | + |
ไวรัสไข้หวัดนก H5/H9 ชนิดย่อยของกรดนิวคลีอิกเป็นบวก | - | + | + | + |
ไวรัสไข้หวัดนก H7/H9 ชนิดย่อยของกรดนิวคลีอิกเป็นบวก | + | - | + | + |
ไวรัสไข้หวัดนก H5/H7/H9 กรดนิวคลีอิกย่อยเป็นบวก | + | + | + | + |
กรดนิวคลีอิกของไวรัสไข้หวัดนกก่อโรคต่ำเป็นบวก | - | - | - | + |
กรดนิวคลีอิกของไวรัสไข้หวัดนกเป็นลบ | - | - | - | - |
*บันทึก:
(1) หากมีเส้นโค้งการขยายเฟสการเติบโตแบบลอการิทึมและค่า Ct ≤ 36 จะถูกตัดสินว่าเป็น +หากไม่มีเส้นโค้งการขยายหรือค่า Ct > 36 จะตัดสินเป็น -ตัวอย่างมีค่าน่าสงสัยเมื่อ 36 < ค่า Ct < 40 ซึ่งต้องทำการทดสอบซ้ำ
(2) หากผลลัพธ์ของประเภทย่อย H5/H7/H9 ใดๆ เป็น + กับช่อง ROX - จะต้องทำการทดสอบซ้ำ
【ข้อควรระวัง】
1. การจัดการห้องปฏิบัติการต้องเป็นไปตามข้อกำหนดการจัดการของห้องปฏิบัติการขยายยีน PCR อย่างเคร่งครัดบุคลากรในห้องปฏิบัติการต้องผ่านการฝึกอบรมอย่างมืออาชีพกระบวนการทดลองจะต้องดำเนินการอย่างเคร่งครัดในพื้นที่ต่างๆ (พื้นที่เตรียมรีเอเจนต์ พื้นที่เตรียมตัวอย่าง พื้นที่ขยาย และพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์)วัสดุสิ้นเปลืองทั้งหมดจะต้องทิ้งหลังจากการฆ่าเชื้อเครื่องมือพิเศษ อุปกรณ์ และวัสดุสิ้นเปลืองในแต่ละขั้นตอนของการดำเนินการทดลองจะต้องไม่ถูกใช้งานร่วมกัน
2. โปรดเตรียมตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพสำหรับขั้นตอนการเตรียมสารและตัวอย่างควรใช้เสื้อโค้ทสำหรับห้องปฏิบัติการ ถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง และปิเปตเตอร์ในระหว่างการทดลอง
3. ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายน้ำยาซ้ำ ๆ เท่าที่จะทำได้ก่อนใช้งาน รีเอเจนต์จะต้องละลายให้หมดและหมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที
4. โปรดใส่ปิเปตที่ใช้ในพื้นที่เตรียมตัวอย่างลงในภาชนะที่มีสารฆ่าเชื้อและทิ้งพร้อมกับของเสียหลังการฆ่าเชื้อ
5. หลังการทดลอง โต๊ะทำงานและปิเปตเตอร์ได้รับการบำบัดด้วยไฮโปคลอไรต์ 10% หรือแอลกอฮอล์ 75% หรือหลอดอัลตราไวโอเลต
【การผลิต】
ชื่อ: มณฑลซานตง Xinda Gene Technology Co., Ltd
บริษัทในเครือของ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
ที่อยู่: อาคาร B2 สวนอุตสาหกรรม Bandaohuigu ถนน Shungeng เมือง Zhucheng มณฑลซานตง
รหัสไปรษณีย์: 262233
โทรศัพท์: +86 - 0532 5882 0810
ชุดตรวจจับไวรัสไข้หวัดนก H5/H7/H9/RNA ชนิดย่อยทั่วไป (PCR-Fluorescence Probing)
【ชื่อผลิตภัณฑ์】
ชุดตรวจ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับไวรัสไข้หวัดนก H5/H7/H9/ชนิดย่อยทั่วไป
【บรรจุุภัณฑ์】
50ชุด/กล่อง
【ส่วนประกอบและเนื้อหาหลัก】
ชื่อ | ข้อมูลจำเพาะ | ปริมาณ |
H5/H7/H9/สารละลายปฏิกิริยาไตรวาเลนท์ทั่วไป | 1250µl/หลอด | 1 |
H5/H7/H9/การควบคุมเชิงบวกทั่วไป | 250µl/หลอด | 1 |
การควบคุมเชิงลบ | 250µl/หลอด | 1 |
【การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา】
เก็บไว้ที่ -20±5℃ แช่แข็งและละลายซ้ำ ≤ 3 ครั้ง อายุการเก็บรักษาคือ 12 เดือน
【แบบอย่าง】
ABI 7500, ABI QuantStudio 5, CFX Connect, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentiter 96E/96R, LineGene 9600 Plus และเครื่องขยายสัญญาณ PCR เชิงปริมาณเรืองแสงอื่นๆ
【วิธีทดสอบ】
1. การสกัดกรดนิวคลีอิก
ชุดสกัด RNA เชิงพาณิชย์สามารถใช้สำหรับการสกัดกรดนิวคลีอิกได้ โปรดปฏิบัติตามคำแนะนำของชุดเครื่องมือ
2. การขยาย PCR
2.1 คำนวณจำนวนตัวอย่างทดสอบ ใช้หลอดปฏิกิริยา PCR n+2 หลอด และเติมสารละลายปฏิกิริยา 25µl ลงในแต่ละหลอด
2.2 เพิ่ม 5µl กรดนิวคลีอิกของการควบคุมเชิงลบ การควบคุมเชิงบวก และตัวอย่างลงในหลอดปฏิกิริยา PCR ข้างต้นตามลำดับ หมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที แล้วใส่ลงในเครื่องขยายสัญญาณ PCR เชิงปริมาณเรืองแสง
2.3 เงื่อนไขการเกิดปฏิกิริยาถูกกำหนดดังนี้:
พารามิเตอร์ที่เกี่ยวข้องของเครื่องขยายเสียง | |||
ระบบ | ปริมาตรรวม: 30µl | ||
การรวบรวมสัญญาณ
| โรคไข้หวัดนก H5/H7/H9/ทั่วไป
| ประเภทย่อย H5 - ช่อง HEX รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |
ประเภทย่อย H7 - ช่อง FAM รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |||
ประเภทย่อย H9 - ช่อง Cy5 รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |||
ทั่วไป - ช่อง ROX รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |||
สภาวะการเกิดปฏิกิริยา PCR
| เวที | Condition | หมายเลขไซเคิล |
การถอดความแบบย้อนกลับ | 55℃: 15 นาที | 1 | |
การเสื่อมสภาพ | 95 ℃: 30 วินาที | 1 | |
พีซีอาร์
| 95 ℃: 10 วินาที |
40
| |
56℃: 30 วินาที (ตั้งค่าเพื่อรวบรวมสัญญาณเรืองแสงเมื่อสิ้นสุดขั้นตอนนี้) |
【การตีความผลลัพธ์】
1. การพิจารณาประสิทธิภาพของชุดทดสอบ :
(1) การควบคุมเชิงบวกที่อ่อนแอ: ค่า Ct ของช่อง FAM, HEX, Cy5 และ ROX ≤ 32, เส้นโค้งการขยายที่มีเฟสเอ็กซ์โปเนนเชียลที่ชัดเจน
(2) การควบคุมเปล่า: ช่องสัญญาณ FAM, HEX, Cy5 และ ROX ไม่มีเส้นโค้งการขยายหรือเส้นโค้งการขยายเป็นเส้นตรงหรือเฉียงเล็กน้อย ไม่มีเฟสเอกซ์โปเนนเชียลที่สำคัญ และค่า Ct ≥ 38 หรือไม่มีค่า Ct
2. การตัดสินผลลัพธ์:
ผลการตัดสิน | ช่องแฟม | ช่อง HEX | ช่อง Cy5 | ช่อง ROX |
ไวรัสไข้หวัดนกชนิดย่อย H5 กรดนิวคลีอิกเป็นบวก | - | + | - | + |
ไวรัสไข้หวัดนกชนิดย่อย H7 กรดนิวคลีอิกเป็นบวก | + | - | - | + |
ไวรัสไข้หวัดนก ชนิดย่อย H9 กรดนิวคลีอิกเป็นบวก | - | - | + | + |
ไวรัสไข้หวัดนก H5/H7 ชนิดย่อยของกรดนิวคลีอิกเป็นบวก | + | + | - | + |
ไวรัสไข้หวัดนก H5/H9 ชนิดย่อยของกรดนิวคลีอิกเป็นบวก | - | + | + | + |
ไวรัสไข้หวัดนก H7/H9 ชนิดย่อยของกรดนิวคลีอิกเป็นบวก | + | - | + | + |
ไวรัสไข้หวัดนก H5/H7/H9 กรดนิวคลีอิกย่อยเป็นบวก | + | + | + | + |
กรดนิวคลีอิกของไวรัสไข้หวัดนกก่อโรคต่ำเป็นบวก | - | - | - | + |
กรดนิวคลีอิกของไวรัสไข้หวัดนกเป็นลบ | - | - | - | - |
*บันทึก:
(1) หากมีเส้นโค้งการขยายเฟสการเติบโตแบบลอการิทึมและค่า Ct ≤ 36 จะถูกตัดสินว่าเป็น +หากไม่มีเส้นโค้งการขยายหรือค่า Ct > 36 จะตัดสินเป็น -ตัวอย่างมีค่าน่าสงสัยเมื่อ 36 < ค่า Ct < 40 ซึ่งต้องทำการทดสอบซ้ำ
(2) หากผลลัพธ์ของประเภทย่อย H5/H7/H9 ใดๆ เป็น + กับช่อง ROX - จะต้องทำการทดสอบซ้ำ
【ข้อควรระวัง】
1. การจัดการห้องปฏิบัติการต้องเป็นไปตามข้อกำหนดการจัดการของห้องปฏิบัติการขยายยีน PCR อย่างเคร่งครัดบุคลากรในห้องปฏิบัติการต้องผ่านการฝึกอบรมอย่างมืออาชีพกระบวนการทดลองจะต้องดำเนินการอย่างเคร่งครัดในพื้นที่ต่างๆ (พื้นที่เตรียมรีเอเจนต์ พื้นที่เตรียมตัวอย่าง พื้นที่ขยาย และพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์)วัสดุสิ้นเปลืองทั้งหมดจะต้องทิ้งหลังจากการฆ่าเชื้อเครื่องมือพิเศษ อุปกรณ์ และวัสดุสิ้นเปลืองในแต่ละขั้นตอนของการดำเนินการทดลองจะต้องไม่ถูกใช้งานร่วมกัน
2. โปรดเตรียมตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพสำหรับขั้นตอนการเตรียมสารและตัวอย่างควรใช้เสื้อโค้ทสำหรับห้องปฏิบัติการ ถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง และปิเปตเตอร์ในระหว่างการทดลอง
3. ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายน้ำยาซ้ำ ๆ เท่าที่จะทำได้ก่อนใช้งาน รีเอเจนต์จะต้องละลายให้หมดและหมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที
4. โปรดใส่ปิเปตที่ใช้ในพื้นที่เตรียมตัวอย่างลงในภาชนะที่มีสารฆ่าเชื้อและทิ้งพร้อมกับของเสียหลังการฆ่าเชื้อ
5. หลังการทดลอง โต๊ะทำงานและปิเปตเตอร์ได้รับการบำบัดด้วยไฮโปคลอไรต์ 10% หรือแอลกอฮอล์ 75% หรือหลอดอัลตราไวโอเลต
【การผลิต】
ชื่อ: มณฑลซานตง Xinda Gene Technology Co., Ltd
บริษัทในเครือของ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
ที่อยู่: อาคาร B2 สวนอุตสาหกรรม Bandaohuigu ถนน Shungeng เมือง Zhucheng มณฑลซานตง
รหัสไปรษณีย์: 262233
โทรศัพท์: +86 - 0532 5882 0810