สถานะห้องว่าง: | |
---|---|
ชุดตรวจ PCR ตามเวลาจริงสำหรับไวรัสอหิวาต์แอฟริกาในสุกร (VP72/I177L)
【ชื่อผลิตภัณฑ์】ชุดตรวจหาเชื้อ PCR ตามเวลาจริงสำหรับไวรัสไข้สุกรแอฟริกัน (VP72/I177L)
【บรรจุุภัณฑ์】50ชุด/กล่อง
【ตัวบ่งชี้】ชุดตรวจหาไวรัสไข้สุกรแอฟริกันใช้ได้กับการตรวจหา DNA ย่อยของไวรัสอหิวาต์สุกรแอฟริกัน VP72/I177L ในตัวอย่างน้ำลาย เลือด เนื้อเยื่อ และสิ่งแวดล้อมของหมูผลการทดสอบมีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น ไม่ใช่เพื่อการวินิจฉัยทางคลินิก
【ส่วนประกอบและเนื้อหาหลัก】
ชื่อ | ข้อมูลจำเพาะ | ปริมาณ |
1,000µl/หลอด | 1 | |
ASFV (VP72/I177L) การควบคุมเชิงบวก | 250µl/หลอด | 1 |
การควบคุมเชิงลบ | 250µl/หลอด | 1 |
【การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา】
เก็บไว้ที่ -20±5℃ แช่แข็งและละลายซ้ำ ≤ 3 ครั้ง อายุการเก็บรักษาคือ 12 เดือน
【แอปพลิเคชัน】ABI QuantStudio 5, CFX Opus 96, LightCycler 480, Gentier 96E/96R, LineGene 9600 Plus และเครื่องมือ PCR แบบเรียลไทม์อื่นๆ
【วิธีทดสอบ】
1. การสกัดกรดนิวคลีอิก
ชุดสกัด DNA เชิงพาณิชย์สามารถดำเนินการสกัดกรดนิวคลีอิกได้ โปรดปฏิบัติตามคำแนะนำของชุดเครื่องมือ
2. การขยาย PCR
2.1 คำนวณจำนวนตัวอย่างทดสอบ ใช้หลอดปฏิกิริยา PCR n+2 หลอด และเติมสารละลายปฏิกิริยา 20µl ลงในแต่ละหลอด
2.2 เติมกรดนิวคลีอิก 5µl ของกลุ่มควบคุมเชิงลบ กลุ่มควบคุมเชิงบวก และตัวอย่างลงในหลอดปฏิกิริยา PRC ด้านบนตามลำดับ หมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที แล้วใส่ลงใน PCR แบบเรียลไทม์...
2.3 มีการตั้งค่าเงื่อนไขการเกิดปฏิกิริยาดังนี้:
พารามิเตอร์ที่เกี่ยวข้องของเครื่องขยายเสียง | |||
ระบบ | ปริมาตรรวม: 25µl | ||
การรวบรวมสัญญาณ | ASFV (VP72/I177L) สัญญาณเรืองแสง | I177L-HEXchannel รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |
ช่อง VP72-FAM รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |||
สภาวะการเกิดปฏิกิริยา PCR | เวที | Condition | หมายเลขไซเคิล |
การประมวลผล UNG | 37℃: 2 นาที | 1 | |
การเสื่อมสภาพ | 95 ℃: 30 วินาที | 1 | |
พีซีอาร์ | 95 ℃: 10 วินาที |
40 | |
60 ℃: 30 วินาที (ตั้งค่าเพื่อรวบรวมสัญญาณเรืองแสงเมื่อสิ้นสุดขั้นตอนนี้) |
【การตีความผลลัพธ์】
1. การพิจารณาประสิทธิภาพของชุดทดสอบ :
(1) การควบคุมเชิงบวก: ค่า Ct ของช่อง FAM และ HEX ≤ 32, เส้นโค้งการขยายที่มีเฟสเอ็กซ์โปเนนเชียลชัดเจน
(2) การควบคุมเชิงลบ: ช่อง FAM และ HEX ไม่มีเส้นโค้งการขยายหรือเส้นโค้งการขยายเป็นเส้นตรงหรือเอียงเล็กน้อย
2. การตัดสินผลลัพธ์:
ผลการตัดสิน | ช่องแฟม | ช่อง HEX |
- | + | |
VP72 ASFV กรดนิวคลีอิกเป็นบวก | + | - |
กรดนิวคลีอิก VP72 และ I177L ASFV เป็นบวก | + | + |
VP72 และ I177L ASFV กรดนิวคลีอิกเป็นลบ | - | - |
*บันทึก:
(1) หากมีเส้นโค้งการขยายที่เพิ่มขึ้นแบบทวีคูณและค่า Ct ≤ 36 สามารถกำหนดเป็น '+'หากไม่มีกราฟการขยายสัญญาณ สามารถกำหนดเป็น '-'เมื่อ 36 < ค่า Ct <40 ควรพิจารณาตัวอย่างว่าเป็นผลที่น่าสงสัย และควรทำการวิเคราะห์ซ้ำสำหรับโครงสร้าง
【ข้อควรระวัง】
1. การจัดการห้องปฏิบัติการต้องเป็นไปตามข้อกำหนดการจัดการของห้องปฏิบัติการขยายยีน PCR อย่างเคร่งครัดบุคลากรในห้องปฏิบัติการต้องผ่านการฝึกอบรมอย่างมืออาชีพกระบวนการทดลองจะต้องดำเนินการอย่างเคร่งครัดในพื้นที่ต่างๆ (พื้นที่เตรียมรีเอเจนต์ พื้นที่เตรียมตัวอย่าง พื้นที่ขยาย และพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์)วัสดุสิ้นเปลืองทั้งหมดจะต้องทิ้งหลังจากการฆ่าเชื้อเครื่องมือ อุปกรณ์ และวัสดุสิ้นเปลืองพิเศษในแต่ละขั้นตอนของการดำเนินการทดลองจะต้องไม่ถูกใช้งานร่วมกัน
2. โปรดเตรียมตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพสำหรับขั้นตอนการเตรียมสารและตัวอย่างควรใช้เสื้อโค้ทสำหรับห้องปฏิบัติการ ถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง และปิเปตเตอร์ในระหว่างการทดลอง
3. ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายน้ำยาซ้ำ ๆ เท่าที่จะทำได้ก่อนใช้งาน รีเอเจนต์จะต้องละลายให้หมดและหมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที
4. โปรดใส่ปิเปตที่ใช้ในพื้นที่เตรียมตัวอย่างลงในภาชนะที่มีสารฆ่าเชื้อและทิ้งพร้อมกับของเสียหลังการฆ่าเชื้อ
5. หลังการทดลอง โต๊ะทำงานและปิเปตเตอร์ได้รับการบำบัดด้วยไฮโปคลอไรต์ 10% หรือแอลกอฮอล์ 75% หรือหลอดอัลตราไวโอเลต
【การผลิต】
ชื่อ: มณฑลซานตง Xinda Gene Technology Co., Ltd
บริษัทในเครือของ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
ที่อยู่: อาคาร B2 สวนอุตสาหกรรม Bandaohuigu ถนน Shungeng เมือง Zhucheng มณฑลซานตง
รหัสไปรษณีย์: 262233
โทรศัพท์: +86 - 0532 5882 0810
ชุดตรวจ PCR ตามเวลาจริงสำหรับไวรัสอหิวาต์แอฟริกาในสุกร (VP72/I177L)
【ชื่อผลิตภัณฑ์】ชุดตรวจหาเชื้อ PCR ตามเวลาจริงสำหรับไวรัสไข้สุกรแอฟริกัน (VP72/I177L)
【บรรจุุภัณฑ์】50ชุด/กล่อง
【ตัวบ่งชี้】ชุดตรวจหาไวรัสไข้สุกรแอฟริกันใช้ได้กับการตรวจหา DNA ย่อยของไวรัสอหิวาต์สุกรแอฟริกัน VP72/I177L ในตัวอย่างน้ำลาย เลือด เนื้อเยื่อ และสิ่งแวดล้อมของหมูผลการทดสอบมีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น ไม่ใช่เพื่อการวินิจฉัยทางคลินิก
【ส่วนประกอบและเนื้อหาหลัก】
ชื่อ | ข้อมูลจำเพาะ | ปริมาณ |
1,000µl/หลอด | 1 | |
ASFV (VP72/I177L) การควบคุมเชิงบวก | 250µl/หลอด | 1 |
การควบคุมเชิงลบ | 250µl/หลอด | 1 |
【การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา】
เก็บไว้ที่ -20±5℃ แช่แข็งและละลายซ้ำ ≤ 3 ครั้ง อายุการเก็บรักษาคือ 12 เดือน
【แอปพลิเคชัน】ABI QuantStudio 5, CFX Opus 96, LightCycler 480, Gentier 96E/96R, LineGene 9600 Plus และเครื่องมือ PCR แบบเรียลไทม์อื่นๆ
【วิธีทดสอบ】
1. การสกัดกรดนิวคลีอิก
ชุดสกัด DNA เชิงพาณิชย์สามารถดำเนินการสกัดกรดนิวคลีอิกได้ โปรดปฏิบัติตามคำแนะนำของชุดเครื่องมือ
2. การขยาย PCR
2.1 คำนวณจำนวนตัวอย่างทดสอบ ใช้หลอดปฏิกิริยา PCR n+2 หลอด และเติมสารละลายปฏิกิริยา 20µl ลงในแต่ละหลอด
2.2 เติมกรดนิวคลีอิก 5µl ของกลุ่มควบคุมเชิงลบ กลุ่มควบคุมเชิงบวก และตัวอย่างลงในหลอดปฏิกิริยา PRC ด้านบนตามลำดับ หมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที แล้วใส่ลงใน PCR แบบเรียลไทม์...
2.3 มีการตั้งค่าเงื่อนไขการเกิดปฏิกิริยาดังนี้:
พารามิเตอร์ที่เกี่ยวข้องของเครื่องขยายเสียง | |||
ระบบ | ปริมาตรรวม: 25µl | ||
การรวบรวมสัญญาณ | ASFV (VP72/I177L) สัญญาณเรืองแสง | I177L-HEXchannel รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |
ช่อง VP72-FAM รวบรวมสัญญาณเรืองแสง | |||
สภาวะการเกิดปฏิกิริยา PCR | เวที | Condition | หมายเลขไซเคิล |
การประมวลผล UNG | 37℃: 2 นาที | 1 | |
การเสื่อมสภาพ | 95 ℃: 30 วินาที | 1 | |
พีซีอาร์ | 95 ℃: 10 วินาที |
40 | |
60 ℃: 30 วินาที (ตั้งค่าเพื่อรวบรวมสัญญาณเรืองแสงเมื่อสิ้นสุดขั้นตอนนี้) |
【การตีความผลลัพธ์】
1. การพิจารณาประสิทธิภาพของชุดทดสอบ :
(1) การควบคุมเชิงบวก: ค่า Ct ของช่อง FAM และ HEX ≤ 32, เส้นโค้งการขยายที่มีเฟสเอ็กซ์โปเนนเชียลชัดเจน
(2) การควบคุมเชิงลบ: ช่อง FAM และ HEX ไม่มีเส้นโค้งการขยายหรือเส้นโค้งการขยายเป็นเส้นตรงหรือเอียงเล็กน้อย
2. การตัดสินผลลัพธ์:
ผลการตัดสิน | ช่องแฟม | ช่อง HEX |
- | + | |
VP72 ASFV กรดนิวคลีอิกเป็นบวก | + | - |
กรดนิวคลีอิก VP72 และ I177L ASFV เป็นบวก | + | + |
VP72 และ I177L ASFV กรดนิวคลีอิกเป็นลบ | - | - |
*บันทึก:
(1) หากมีเส้นโค้งการขยายที่เพิ่มขึ้นแบบทวีคูณและค่า Ct ≤ 36 สามารถกำหนดเป็น '+'หากไม่มีกราฟการขยายสัญญาณ สามารถกำหนดเป็น '-'เมื่อ 36 < ค่า Ct <40 ควรพิจารณาตัวอย่างว่าเป็นผลที่น่าสงสัย และควรทำการวิเคราะห์ซ้ำสำหรับโครงสร้าง
【ข้อควรระวัง】
1. การจัดการห้องปฏิบัติการต้องเป็นไปตามข้อกำหนดการจัดการของห้องปฏิบัติการขยายยีน PCR อย่างเคร่งครัดบุคลากรในห้องปฏิบัติการต้องผ่านการฝึกอบรมอย่างมืออาชีพกระบวนการทดลองจะต้องดำเนินการอย่างเคร่งครัดในพื้นที่ต่างๆ (พื้นที่เตรียมรีเอเจนต์ พื้นที่เตรียมตัวอย่าง พื้นที่ขยาย และพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์)วัสดุสิ้นเปลืองทั้งหมดจะต้องทิ้งหลังจากการฆ่าเชื้อเครื่องมือ อุปกรณ์ และวัสดุสิ้นเปลืองพิเศษในแต่ละขั้นตอนของการดำเนินการทดลองจะต้องไม่ถูกใช้งานร่วมกัน
2. โปรดเตรียมตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพสำหรับขั้นตอนการเตรียมสารและตัวอย่างควรใช้เสื้อโค้ทสำหรับห้องปฏิบัติการ ถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง และปิเปตเตอร์ในระหว่างการทดลอง
3. ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายน้ำยาซ้ำ ๆ เท่าที่จะทำได้ก่อนใช้งาน รีเอเจนต์จะต้องละลายให้หมดและหมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที
4. โปรดใส่ปิเปตที่ใช้ในพื้นที่เตรียมตัวอย่างลงในภาชนะที่มีสารฆ่าเชื้อและทิ้งพร้อมกับของเสียหลังการฆ่าเชื้อ
5. หลังการทดลอง โต๊ะทำงานและปิเปตเตอร์ได้รับการบำบัดด้วยไฮโปคลอไรต์ 10% หรือแอลกอฮอล์ 75% หรือหลอดอัลตราไวโอเลต
【การผลิต】
ชื่อ: มณฑลซานตง Xinda Gene Technology Co., Ltd
บริษัทในเครือของ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
ที่อยู่: อาคาร B2 สวนอุตสาหกรรม Bandaohuigu ถนน Shungeng เมือง Zhucheng มณฑลซานตง
รหัสไปรษณีย์: 262233
โทรศัพท์: +86 - 0532 5882 0810