สถานะห้องว่าง: | |
---|---|
ชุดตรวจหา RNA ไวรัสโรคติดเชื้อ Bursal (PCR-Fluorescence Probing)
【ชื่อผลิตภัณฑ์】ชุดตรวจหา PCR ตามเวลาจริงสำหรับไวรัสโรคติดเชื้อ Bursal
【บรรจุุภัณฑ์】50ชุด/กล่อง
【ตัวบ่งชี้】ชุดตรวจหา PCR ตามเวลาจริงสำหรับไวรัสโรคติดเชื้อ Bursal สามารถใช้ได้กับการตรวจหา RNA ของไวรัสโรค Bursal ติดเชื้อในไม้กวาดคอนก ไม้กวาด Cloaca เนื้อเยื่อ ของเหลวอัลลันโทอิกของตัวอ่อนไก่ และการเพาะเลี้ยงเซลล์ผลการทดสอบมีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น ไม่ใช่เพื่อการวินิจฉัยทางคลินิก
【ส่วนประกอบและเนื้อหาหลัก】
ชื่อ | ข้อมูลจำเพาะ | ปริมาณ |
โซลูชันปฏิกิริยา IBDV | 1,000µl/หลอด | 1 |
IBDV การควบคุมเชิงบวก | 250µl/หลอด | 1 |
การควบคุมเชิงลบ | 250µl/หลอด | 1 |
【การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา】
เก็บไว้ที่ -20±5℃ แช่แข็งและละลายซ้ำ ≤ 3 ครั้ง อายุการเก็บรักษาคือ 12 เดือน
【วิธีทดสอบ】
1. การสกัดกรดนิวคลีอิก
ชุดสกัด RNA เชิงพาณิชย์สามารถใช้สำหรับการสกัดกรดนิวคลีอิกได้ โปรดปฏิบัติตามคำแนะนำของชุดเครื่องมือ
2. การขยาย PCR
2.1 คำนวณจำนวนตัวอย่างทดสอบ ใช้หลอดปฏิกิริยา PCR n+2 หลอด และเติมสารละลายปฏิกิริยา 20µl ลงในแต่ละหลอด
2.2 เติมกรดนิวคลีอิก 2µl ของตัวอย่างกลุ่มควบคุมเชิงลบ กลุ่มควบคุมเชิงบวก และตัวอย่างกรดนิวคลีอิกลงในหลอดปฏิกิริยา PRC ด้านบนตามลำดับ หมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที แล้วใส่เข้าไปในเครื่องขยายสัญญาณ PCR เชิงปริมาณเรืองแสง
3. การขยาย qR-T-PCR
3.1 การเลือกช่องฟลูออเรสเซนต์
Reporter Dye1: เลือกช่อง FAM เพื่อตรวจหาวัคซีน MS-H สายพันธุ์ Quencher Dye: NONE
Reporter Dye2: เลือกช่อง VIC หรือ HEX เพื่อตรวจหาสายพันธุ์ไวรัส MS wild, Quencher Dye2: ไม่มี, การอ้างอิงแบบพาสซีฟ: ไม่มีโปรดดูคู่มืออุปกรณ์สำหรับเครื่องมืออื่นๆ
3.2 เงื่อนไขการเกิดปฏิกิริยาถูกกำหนดเป็น:
พารามิเตอร์ของการขยาย | |||
ระบบ | ปริมาตรรวมคือ 25µl | ||
สภาวะปฏิกิริยาของ PCR | เฟส | เงื่อนไข | รอบ |
ก่อนการเสียสภาพธรรมชาติ | 95℃ เป็นเวลา 5 นาที | 1 | |
พีซีอาร์ | 95℃ เป็นเวลา 10 วินาที |
40 | |
60 ℃ เป็นเวลา 30 วินาที |
【การตีความผลลัพธ์】
1. ข้อกำหนดต่อไปนี้จะต้องจับคู่พร้อมกันในการทดสอบหนึ่งครั้ง มิฉะนั้นการทดสอบจะไม่ถูกต้องและจำเป็นต้องทำซ้ำ
การควบคุมเชิงลบไม่มีเส้นโค้งการขยาย
เส้นโค้งการขยายของช่องสัญญาณ FAM ควบคุมเชิงบวกมีเฟสการเติบโตแบบลอการิทึมที่สำคัญ และค่า Ct ของเส้นโค้งการขยายช่องสัญญาณ FAM คือ ≤ 32
2. หากช่องสัญญาณ FAM ของตัวอย่างทดสอบไม่มีเส้นโค้งการขยาย ตัวอย่างสามารถระบุได้ว่าเป็นผลลบ IBDVหากแชนเนล FAM มีกราฟการขยายเฟสการเติบโตแบบลอการิทึมและค่า Ct ≤ 36 ซึ่งสามารถกำหนดเป็น IBDV positive36 < ค่า Ct < 40 คือตัวอย่างที่น่าสงสัยซึ่งจำเป็นต้องตรวจซ้ำเพื่อยืนยัน
【ข้อควรระวัง】
1. การจัดการห้องปฏิบัติการต้องเป็นไปตามข้อกำหนดการจัดการของห้องปฏิบัติการขยายยีน PCR อย่างเคร่งครัดบุคลากรในห้องปฏิบัติการต้องผ่านการฝึกอบรมอย่างมืออาชีพกระบวนการทดลองจะต้องดำเนินการอย่างเคร่งครัดในพื้นที่ต่างๆ (พื้นที่เตรียมรีเอเจนต์ พื้นที่เตรียมชิ้นงานทดสอบ พื้นที่ขยาย และพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์)วัสดุสิ้นเปลืองทั้งหมดจะต้องทิ้งหลังจากการฆ่าเชื้อเครื่องมือพิเศษ อุปกรณ์ และวัสดุสิ้นเปลืองในแต่ละขั้นตอนของการดำเนินการทดลองจะต้องไม่ถูกใช้งานร่วมกัน
2. โปรดเตรียมตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพสำหรับขั้นตอนการเตรียมสารและตัวอย่างควรใช้เสื้อโค้ทสำหรับห้องปฏิบัติการ ถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง และปิเปตเตอร์ในระหว่างการทดลอง
3. ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและการละลายน้ำยาซ้ำ ๆ เท่าที่จะทำได้ก่อนใช้งาน รีเอเจนต์จะต้องละลายให้หมดและหมุนเหวี่ยงที่ 8000rpm เป็นเวลาหลายวินาที
4. โปรดใส่ปิเปตที่ใช้ในพื้นที่เตรียมตัวอย่างลงในภาชนะที่มีสารฆ่าเชื้อและทิ้งพร้อมกับของเสียหลังการฆ่าเชื้อ
5. หลังการทดลอง โต๊ะทำงานและปิเปตเตอร์ได้รับการบำบัดด้วยไฮโปคลอไรต์ 10% หรือแอลกอฮอล์ 75% หรือหลอดอัลตราไวโอเลต
【การผลิต】
ชื่อ: มณฑลซานตง Xinda Gene Technology Co., Ltd
บริษัทในเครือของ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
ที่อยู่: อาคาร B2 สวนอุตสาหกรรม Bandaohuigu ถนน Shungeng เมือง Zhucheng มณฑลซานตง
รหัสไปรษณีย์: 262233
โทรศัพท์: +86 - 0532 5882 0810
ชุดตรวจหา RNA ไวรัสโรคติดเชื้อ Bursal (PCR-Fluorescence Probing)
【ชื่อผลิตภัณฑ์】ชุดตรวจหา PCR ตามเวลาจริงสำหรับไวรัสโรคติดเชื้อ Bursal
【บรรจุุภัณฑ์】50ชุด/กล่อง
【ตัวบ่งชี้】ชุดตรวจหา PCR ตามเวลาจริงสำหรับไวรัสโรคติดเชื้อ Bursal สามารถใช้ได้กับการตรวจหา RNA ของไวรัสโรค Bursal ติดเชื้อในไม้กวาดคอนก ไม้กวาด Cloaca เนื้อเยื่อ ของเหลวอัลลันโทอิกของตัวอ่อนไก่ และการเพาะเลี้ยงเซลล์ผลการทดสอบมีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น ไม่ใช่เพื่อการวินิจฉัยทางคลินิก
【ส่วนประกอบและเนื้อหาหลัก】
ชื่อ | ข้อมูลจำเพาะ | ปริมาณ |
โซลูชันปฏิกิริยา IBDV | 1,000µl/หลอด | 1 |
IBDV การควบคุมเชิงบวก | 250µl/หลอด | 1 |
การควบคุมเชิงลบ | 250µl/หลอด | 1 |
【การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา】
เก็บไว้ที่ -20±5℃ แช่แข็งและละลายซ้ำ ≤ 3 ครั้ง อายุการเก็บรักษาคือ 12 เดือน
【วิธีทดสอบ】
1. การสกัดกรดนิวคลีอิก
ชุดสกัด RNA เชิงพาณิชย์สามารถใช้สำหรับการสกัดกรดนิวคลีอิกได้ โปรดปฏิบัติตามคำแนะนำของชุดเครื่องมือ
2. การขยาย PCR
2.1 คำนวณจำนวนตัวอย่างทดสอบ ใช้หลอดปฏิกิริยา PCR n+2 หลอด และเติมสารละลายปฏิกิริยา 20µl ลงในแต่ละหลอด
2.2 เติมกรดนิวคลีอิก 2µl ของตัวอย่างกลุ่มควบคุมเชิงลบ กลุ่มควบคุมเชิงบวก และตัวอย่างกรดนิวคลีอิกลงในหลอดปฏิกิริยา PRC ด้านบนตามลำดับ หมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที แล้วใส่เข้าไปในเครื่องขยายสัญญาณ PCR เชิงปริมาณเรืองแสง
3. การขยาย qR-T-PCR
3.1 การเลือกช่องฟลูออเรสเซนต์
Reporter Dye1: เลือกช่อง FAM เพื่อตรวจหาวัคซีน MS-H สายพันธุ์ Quencher Dye: NONE
Reporter Dye2: เลือกช่อง VIC หรือ HEX เพื่อตรวจหาสายพันธุ์ไวรัส MS wild, Quencher Dye2: ไม่มี, การอ้างอิงแบบพาสซีฟ: ไม่มีโปรดดูคู่มืออุปกรณ์สำหรับเครื่องมืออื่นๆ
3.2 เงื่อนไขการเกิดปฏิกิริยาถูกกำหนดเป็น:
พารามิเตอร์ของการขยาย | |||
ระบบ | ปริมาตรรวมคือ 25µl | ||
สภาวะปฏิกิริยาของ PCR | เฟส | เงื่อนไข | รอบ |
ก่อนการเสียสภาพธรรมชาติ | 95℃ เป็นเวลา 5 นาที | 1 | |
พีซีอาร์ | 95℃ เป็นเวลา 10 วินาที |
40 | |
60 ℃ เป็นเวลา 30 วินาที |
【การตีความผลลัพธ์】
1. ข้อกำหนดต่อไปนี้จะต้องจับคู่พร้อมกันในการทดสอบหนึ่งครั้ง มิฉะนั้นการทดสอบจะไม่ถูกต้องและจำเป็นต้องทำซ้ำ
การควบคุมเชิงลบไม่มีเส้นโค้งการขยาย
เส้นโค้งการขยายของช่องสัญญาณ FAM ควบคุมเชิงบวกมีเฟสการเติบโตแบบลอการิทึมที่สำคัญ และค่า Ct ของเส้นโค้งการขยายช่องสัญญาณ FAM คือ ≤ 32
2. หากช่องสัญญาณ FAM ของตัวอย่างทดสอบไม่มีเส้นโค้งการขยาย ตัวอย่างสามารถระบุได้ว่าเป็นผลลบ IBDVหากแชนเนล FAM มีกราฟการขยายเฟสการเติบโตแบบลอการิทึมและค่า Ct ≤ 36 ซึ่งสามารถกำหนดเป็น IBDV positive36 < ค่า Ct < 40 คือตัวอย่างที่น่าสงสัยซึ่งจำเป็นต้องตรวจซ้ำเพื่อยืนยัน
【ข้อควรระวัง】
1. การจัดการห้องปฏิบัติการต้องเป็นไปตามข้อกำหนดการจัดการของห้องปฏิบัติการขยายยีน PCR อย่างเคร่งครัดบุคลากรในห้องปฏิบัติการต้องผ่านการฝึกอบรมอย่างมืออาชีพกระบวนการทดลองจะต้องดำเนินการอย่างเคร่งครัดในพื้นที่ต่างๆ (พื้นที่เตรียมรีเอเจนต์ พื้นที่เตรียมชิ้นงานทดสอบ พื้นที่ขยาย และพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์)วัสดุสิ้นเปลืองทั้งหมดจะต้องทิ้งหลังจากการฆ่าเชื้อเครื่องมือพิเศษ อุปกรณ์ และวัสดุสิ้นเปลืองในแต่ละขั้นตอนของการดำเนินการทดลองจะต้องไม่ถูกใช้งานร่วมกัน
2. โปรดเตรียมตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพสำหรับขั้นตอนการเตรียมสารและตัวอย่างควรใช้เสื้อโค้ทสำหรับห้องปฏิบัติการ ถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง และปิเปตเตอร์ในระหว่างการทดลอง
3. ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและการละลายน้ำยาซ้ำ ๆ เท่าที่จะทำได้ก่อนใช้งาน รีเอเจนต์จะต้องละลายให้หมดและหมุนเหวี่ยงที่ 8000rpm เป็นเวลาหลายวินาที
4. โปรดใส่ปิเปตที่ใช้ในพื้นที่เตรียมตัวอย่างลงในภาชนะที่มีสารฆ่าเชื้อและทิ้งพร้อมกับของเสียหลังการฆ่าเชื้อ
5. หลังการทดลอง โต๊ะทำงานและปิเปตเตอร์ได้รับการบำบัดด้วยไฮโปคลอไรต์ 10% หรือแอลกอฮอล์ 75% หรือหลอดอัลตราไวโอเลต
【การผลิต】
ชื่อ: มณฑลซานตง Xinda Gene Technology Co., Ltd
บริษัทในเครือของ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
ที่อยู่: อาคาร B2 สวนอุตสาหกรรม Bandaohuigu ถนน Shungeng เมือง Zhucheng มณฑลซานตง
รหัสไปรษณีย์: 262233
โทรศัพท์: +86 - 0532 5882 0810