 |
ชุดตรวจ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับ Mycoplasma Bovis
【ชื่อผลิตภัณฑ์】ชุดตรวจ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับ Mycoplasma Bovis
【บรรจุุภัณฑ์】50 การทดสอบ
【ข้อบ่งชี้】ชุดตรวจหาเชื้อ Mycoplasma Bovis แบบเรียลไทม์สำหรับ Mycoplasma Bovis สามารถใช้เพื่อตรวจหา Mycoplasma Bovis RNA ในตัวอย่างจากไม้กวาดจมูก นม ของเหลวจากข้อต่อผลการทดสอบมีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น ไม่ใช่เพื่อการวินิจฉัยทางคลินิก
【ส่วนประกอบและเนื้อหาหลัก】
ชื่อ | ข้อมูลจำเพาะ | ปริมาณ |
โซลูชันปฏิกิริยา MB | 1150µl/หลอด | 1 |
MB การควบคุมเชิงบวก | 100µl/หลอด | 1 |
การควบคุมเชิงลบ | 100µl/หลอด | 1 |
【การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา】
เก็บไว้ที่ -20±5℃ แช่แข็งและละลายซ้ำ ≤ 3 ครั้ง อายุการเก็บรักษาคือ 12 เดือน
【วิธีทดสอบ】
1. การสกัดกรดนิวคลีอิก
ชุดสกัด RNA เชิงพาณิชย์สามารถใช้สำหรับการสกัดกรดนิวคลีอิกได้ โปรดปฏิบัติตามคำแนะนำของชุดเครื่องมือ
2. การขยายสัญญาณ PCR (ตัวอย่าง ABI 7500 โปรดดูการดำเนินการนี้และคู่มือสำหรับ ABI 7300 และ LC480)
2.1 คำนวณจำนวนตัวอย่างทดสอบ ใช้ n+2 หลอดปฏิกิริยา PCR และเพิ่ม 20µl ถึงของสารละลายปฏิกิริยาต่อหลอดแต่ละหลอด
2.2 เติมกรดนิวคลีอิก 5µl ของการควบคุมเชิงลบ การควบคุมเชิงบวก และตัวอย่างลงในหลอดปฏิกิริยา PRC ข้างต้นตามลำดับ หมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที แล้วใส่ลงในเครื่องขยายสัญญาณ PCR เชิงปริมาณเรืองแสง
3. การขยายสัญญาณ qRT-PCR
3.1 ช่องสัญญาณฟลูออเรสเซนต์: โหมดการตรวจจับโพรบถูกตั้งค่าเป็น: Reporter Dye1: FAM และ Quencher Dye:NONE
3.2 เงื่อนไขของปฏิกิริยาจะต้องกำหนดเป็น:
พารามิเตอร์ของการขยาย | |||
ระบบ | ปริมาตรรวมคือ 25µl | ||
สภาวะปฏิกิริยาของ PCR | เฟส | เงื่อนไข | รอบ |
กระบวนการ UNG | 37℃ เป็นเวลา 2 นาที | 1 | |
ก่อนการเสียสภาพธรรมชาติ | 95℃ เป็นเวลา 30 วินาที | 1 | |
พีซีอาร์ | 95℃ เป็นเวลา 10 วินาที |
40 | |
60 ℃ เป็นเวลา 30 วินาที กำหนดให้รวบรวมสัญญาณเรืองแสงที่ สิ้นสุดระยะนี้ | |||
【การตีความผลลัพธ์】
1. การตัดสินความถูกต้อง:
1.1 การควบคุมเชิงบวก: ค่า Ct ของช่องสัญญาณ FAM ≤ 32 และเส้นโค้งการขยายมีเฟสการเติบโตแบบทวีคูณที่มีนัยสำคัญ
1.2 การควบคุมเชิงลบ: ช่อง FAM ไม่มีเส้นโค้งการขยายหรือเส้นโค้งการขยายเป็นเส้นตรงหรือเส้นเฉียงเล็กน้อย
2. การตัดสินผลการทดสอบ:
หากช่องตรวจจับ FAM ของตัวอย่างทดสอบมี ไม่มีเส้นโค้งการขยายมันสามารถกำหนดเป็น ลบ MB
หากช่องตรวจจับ FAM มีเส้นโค้งการขยายที่เพิ่มขึ้นแบบทวีคูณ และค่า Ct คือ ≤ 36มันสามารถกำหนดเป็น MB บวก.
36 ควรพิจารณาตัวอย่างเป็น ผลลัพธ์ที่น่าสงสัยและควรทำการวิเคราะห์ซ้ำเพื่อยืนยัน
【ข้อควรระวัง】
1. การจัดการห้องปฏิบัติการต้องเป็นไปตามข้อกำหนดการจัดการของห้องปฏิบัติการขยายยีน PCR อย่างเคร่งครัดบุคลากรในห้องปฏิบัติการต้องผ่านการฝึกอบรมอย่างมืออาชีพกระบวนการทดลองจะต้องดำเนินการอย่างเคร่งครัดในพื้นที่ต่างๆ (พื้นที่เตรียมรีเอเจนต์ พื้นที่เตรียมชิ้นงานทดสอบ พื้นที่ขยาย และพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์)วัสดุสิ้นเปลืองทั้งหมดจะต้องทิ้งหลังจากการฆ่าเชื้อเครื่องมือพิเศษ อุปกรณ์ และวัสดุสิ้นเปลืองในแต่ละขั้นตอนของการดำเนินการทดลองจะต้องไม่ถูกใช้งานร่วมกัน
2. โปรดเตรียมตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพสำหรับขั้นตอนการเตรียมสารและตัวอย่างควรใช้เสื้อโค้ทสำหรับห้องปฏิบัติการ ถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง และปิเปตเตอร์ในระหว่างการทดลอง
3. ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและการละลายน้ำยาซ้ำ ๆ เท่าที่จะทำได้ก่อนใช้งาน รีเอเจนต์จะต้องละลายให้หมดและหมุนเหวี่ยงที่ 8000rpm เป็นเวลาหลายวินาที
4. โปรดใส่ปิเปตที่ใช้ในพื้นที่เตรียมตัวอย่างลงในภาชนะที่มีสารฆ่าเชื้อและทิ้งพร้อมกับของเสียหลังการฆ่าเชื้อ
5. หลังการทดลอง โต๊ะทำงานและปิเปตเตอร์ต้องได้รับการบำบัดด้วยไฮโปคลอไรต์ 10% หรือแอลกอฮอล์ 75% หรือหลอดอัลตราไวโอเลต
【การผลิต】
ชื่อ: มณฑลซานตง Xinda Gene Technology Co., Ltd
บริษัทในเครือของ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
ที่อยู่: อาคาร B2 สวนอุตสาหกรรม Bandaohuigu ถนน Shungeng เมือง Zhucheng มณฑลซานตง
รหัสไปรษณีย์: 262233
โทรศัพท์: +86 - 0532 5882 0810
ชุดตรวจ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับ Mycoplasma Bovis
【ชื่อผลิตภัณฑ์】ชุดตรวจ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับ Mycoplasma Bovis
【บรรจุุภัณฑ์】50 การทดสอบ
【ข้อบ่งชี้】ชุดตรวจหาเชื้อ Mycoplasma Bovis แบบเรียลไทม์สำหรับ Mycoplasma Bovis สามารถใช้เพื่อตรวจหา Mycoplasma Bovis RNA ในตัวอย่างจากไม้กวาดจมูก นม ของเหลวจากข้อต่อผลการทดสอบมีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น ไม่ใช่เพื่อการวินิจฉัยทางคลินิก
【ส่วนประกอบและเนื้อหาหลัก】
ชื่อ | ข้อมูลจำเพาะ | ปริมาณ |
โซลูชันปฏิกิริยา MB | 1150µl/หลอด | 1 |
MB การควบคุมเชิงบวก | 100µl/หลอด | 1 |
การควบคุมเชิงลบ | 100µl/หลอด | 1 |
【การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา】
เก็บไว้ที่ -20±5℃ แช่แข็งและละลายซ้ำ ≤ 3 ครั้ง อายุการเก็บรักษาคือ 12 เดือน
【วิธีทดสอบ】
1. การสกัดกรดนิวคลีอิก
ชุดสกัด RNA เชิงพาณิชย์สามารถใช้สำหรับการสกัดกรดนิวคลีอิกได้ โปรดปฏิบัติตามคำแนะนำของชุดเครื่องมือ
2. การขยายสัญญาณ PCR (ตัวอย่าง ABI 7500 โปรดดูการดำเนินการนี้และคู่มือสำหรับ ABI 7300 และ LC480)
2.1 คำนวณจำนวนตัวอย่างทดสอบ ใช้ n+2 หลอดปฏิกิริยา PCR และเพิ่ม 20µl ถึงของสารละลายปฏิกิริยาต่อหลอดแต่ละหลอด
2.2 เติมกรดนิวคลีอิก 5µl ของการควบคุมเชิงลบ การควบคุมเชิงบวก และตัวอย่างลงในหลอดปฏิกิริยา PRC ข้างต้นตามลำดับ หมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที แล้วใส่ลงในเครื่องขยายสัญญาณ PCR เชิงปริมาณเรืองแสง
3. การขยายสัญญาณ qRT-PCR
3.1 ช่องสัญญาณฟลูออเรสเซนต์: โหมดการตรวจจับโพรบถูกตั้งค่าเป็น: Reporter Dye1: FAM และ Quencher Dye:NONE
3.2 เงื่อนไขของปฏิกิริยาจะต้องกำหนดเป็น:
พารามิเตอร์ของการขยาย | |||
ระบบ | ปริมาตรรวมคือ 25µl | ||
สภาวะปฏิกิริยาของ PCR | เฟส | เงื่อนไข | รอบ |
กระบวนการ UNG | 37℃ เป็นเวลา 2 นาที | 1 | |
ก่อนการเสียสภาพธรรมชาติ | 95℃ เป็นเวลา 30 วินาที | 1 | |
พีซีอาร์ | 95℃ เป็นเวลา 10 วินาที |
40 | |
60 ℃ เป็นเวลา 30 วินาที กำหนดให้รวบรวมสัญญาณเรืองแสงที่ สิ้นสุดระยะนี้ | |||
【การตีความผลลัพธ์】
1. การตัดสินความถูกต้อง:
1.1 การควบคุมเชิงบวก: ค่า Ct ของช่องสัญญาณ FAM ≤ 32 และเส้นโค้งการขยายมีเฟสการเติบโตแบบทวีคูณที่มีนัยสำคัญ
1.2 การควบคุมเชิงลบ: ช่อง FAM ไม่มีเส้นโค้งการขยายหรือเส้นโค้งการขยายเป็นเส้นตรงหรือเส้นเฉียงเล็กน้อย
2. การตัดสินผลการทดสอบ:
หากช่องตรวจจับ FAM ของตัวอย่างทดสอบมี ไม่มีเส้นโค้งการขยายมันสามารถกำหนดเป็น ลบ MB
หากช่องตรวจจับ FAM มีเส้นโค้งการขยายที่เพิ่มขึ้นแบบทวีคูณ และค่า Ct คือ ≤ 36มันสามารถกำหนดเป็น MB บวก.
36 ควรพิจารณาตัวอย่างเป็น ผลลัพธ์ที่น่าสงสัยและควรทำการวิเคราะห์ซ้ำเพื่อยืนยัน
【ข้อควรระวัง】
1. การจัดการห้องปฏิบัติการต้องเป็นไปตามข้อกำหนดการจัดการของห้องปฏิบัติการขยายยีน PCR อย่างเคร่งครัดบุคลากรในห้องปฏิบัติการต้องผ่านการฝึกอบรมอย่างมืออาชีพกระบวนการทดลองจะต้องดำเนินการอย่างเคร่งครัดในพื้นที่ต่างๆ (พื้นที่เตรียมรีเอเจนต์ พื้นที่เตรียมชิ้นงานทดสอบ พื้นที่ขยาย และพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์)วัสดุสิ้นเปลืองทั้งหมดจะต้องทิ้งหลังจากการฆ่าเชื้อเครื่องมือพิเศษ อุปกรณ์ และวัสดุสิ้นเปลืองในแต่ละขั้นตอนของการดำเนินการทดลองจะต้องไม่ถูกใช้งานร่วมกัน
2. โปรดเตรียมตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพสำหรับขั้นตอนการเตรียมสารและตัวอย่างควรใช้เสื้อโค้ทสำหรับห้องปฏิบัติการ ถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง และปิเปตเตอร์ในระหว่างการทดลอง
3. ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและการละลายน้ำยาซ้ำ ๆ เท่าที่จะทำได้ก่อนใช้งาน รีเอเจนต์จะต้องละลายให้หมดและหมุนเหวี่ยงที่ 8000rpm เป็นเวลาหลายวินาที
4. โปรดใส่ปิเปตที่ใช้ในพื้นที่เตรียมตัวอย่างลงในภาชนะที่มีสารฆ่าเชื้อและทิ้งพร้อมกับของเสียหลังการฆ่าเชื้อ
5. หลังการทดลอง โต๊ะทำงานและปิเปตเตอร์ต้องได้รับการบำบัดด้วยไฮโปคลอไรต์ 10% หรือแอลกอฮอล์ 75% หรือหลอดอัลตราไวโอเลต
【การผลิต】
ชื่อ: มณฑลซานตง Xinda Gene Technology Co., Ltd
บริษัทในเครือของ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
ที่อยู่: อาคาร B2 สวนอุตสาหกรรม Bandaohuigu ถนน Shungeng เมือง Zhucheng มณฑลซานตง
รหัสไปรษณีย์: 262233
โทรศัพท์: +86 - 0532 5882 0810
