เอ็มเอส พีซีอาร์

ชุดตรวจหา PCR แบบเรียลไทม์สำหรับ Mycoplasma Synoviae

【ชื่อผลิตภัณฑ์】ชุดตรวจหา PCR แบบเรียลไทม์สำหรับ Mycoplasma Synoviae (MS)

【บรรจุุภัณฑ์】50ชุด/กล่อง

【ตัวบ่งชี้】ชุดตรวจ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับ Mycoplasma Synoviae ใช้ได้กับการตรวจหา Mycoplasma Synoviae DNA ในตัวอย่างระบบทางเดินหายใจของนก เนื้อเยื่อปอด และตัวอย่างอื่นๆผลการทดสอบมีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น ไม่ใช่เพื่อการวินิจฉัยทางคลินิก

【ส่วนประกอบและเนื้อหาหลัก】

【การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา】

เก็บไว้ที่ -20±5℃ แช่แข็งและละลายซ้ำ ≤ 3 ครั้ง อายุการเก็บรักษาคือ 12 เดือน

【ทฤษฎี】

ชุดเครื่องมือนี้ใช้เทคโนโลยี Real-Time Fluorescent PCR โดยเลือกไวรัสธรรมชาติของ Mycoplasma Synoviaes และบริเวณที่ได้รับการอนุรักษ์ของวัคซีนสายพันธุ์ MS-H เป็นพื้นที่เป้าหมายในการขยายสัญญาณ ออกแบบโพรบไพรเมอร์เฉพาะและทำเครื่องหมายกลุ่มเรืองแสงต่างๆ และดำเนินการเชิงคุณภาพ การตรวจจับ Mycoplasma Synoviae ผ่านการขยายระบบ PCR เรืองแสงตามเวลาจริงขั้นตอนเดียว นอกจากไพรเมอร์และโพรบเรืองแสงเฉพาะแล้ว ระบบปฏิกิริยายังติดตั้ง PCR Buffer, เอนไซม์ Taq ที่สอดคล้องกันdNTPs, Mg2+ และส่วนประกอบอื่นๆ ซึ่งสามารถตรวจจับกรดนิวคลีอิก MS ที่ละเอียดอ่อนและจำเพาะได้ และระบุไวรัสป่าและวัคซีนสายพันธุ์ MS-H

【อุปกรณ์】ABI 7500, ABI 7300, LightCycler480 หรือเครื่องมือ PCR เชิงปริมาณฟลูออเรสเซนต์แบบเดียวกันอื่นๆ

【ความต้องการตัวอย่าง】

ตัวอย่างระบบทางเดินหายใจและตัวอย่างปอด

【วิธีทดสอบ】

1. การสกัดกรดนิวคลีอิก

ชุดสกัด DNA เชิงพาณิชย์สามารถดำเนินการสกัดกรดนิวคลีอิกได้ โปรดปฏิบัติตามคำแนะนำของชุดเครื่องมือ

2. การขยาย PCR

2.1 คำนวณจำนวนตัวอย่างทดสอบ ใช้หลอดปฏิกิริยา PCR n+2 หลอด และเติมสารละลายปฏิกิริยา 18µl ลงในแต่ละหลอด

2.2 เติมกรดนิวคลีอิก 2µl ของตัวอย่างกลุ่มควบคุมเชิงลบ กลุ่มควบคุมเชิงบวก และตัวอย่างกรดนิวคลีอิกลงในหลอดปฏิกิริยา PRC ข้างต้นตามลำดับ หมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที แล้วใส่เข้าไปในเครื่องขยายสัญญาณ PCR เชิงปริมาณเรืองแสง

3. การขยาย qR-T-PCR

3.1 การเลือกช่องฟลูออเรสเซนต์

Reporter Dye1: เลือกช่อง FAM เพื่อตรวจหาวัคซีน MS-H สายพันธุ์ Quencher Dye: ไม่มี

Reporter Dye2: เลือกช่อง VIC หรือ HEX เพื่อตรวจหาสายพันธุ์ไวรัส MS wild, Quencher Dye2: ไม่มี, การอ้างอิงแบบพาสซีฟ: ไม่มีโปรดดูคู่มืออุปกรณ์สำหรับเครื่องมืออื่นๆ

3.2 เงื่อนไขการเกิดปฏิกิริยาถูกกำหนดเป็น:

【การตีความผลลัพธ์】

1. ข้อกำหนดต่อไปนี้จะต้องจับคู่พร้อมกันในการทดสอบหนึ่งครั้ง มิฉะนั้นการทดสอบจะไม่ถูกต้องและจำเป็นต้องทำซ้ำ

การควบคุมเชิงลบไม่มีเส้นโค้งการขยาย

เส้นโค้งการขยายของช่องสัญญาณ FAM ควบคุมเชิงบวกมีเฟสการเติบโตแบบลอการิทึมที่สำคัญ และค่า Ct ของเส้นโค้งการขยายช่องสัญญาณ FAM คือ ≤ 32

2. หากช่องสัญญาณ FAM ของตัวอย่างทดสอบไม่มีเส้นโค้งการขยาย ตัวอย่างสามารถระบุได้ว่าเป็นผลลบ IBDVหากแชนเนล FAM มีกราฟการขยายเฟสการเติบโตแบบลอการิทึมและค่า Ct ≤ 36 ซึ่งสามารถกำหนดเป็น IBDV positive36 < ค่า Ct < 40 คือตัวอย่างที่น่าสงสัยซึ่งจำเป็นต้องตรวจซ้ำเพื่อยืนยัน

【ข้อควรระวัง】

1. การจัดการห้องปฏิบัติการต้องเป็นไปตามข้อกำหนดการจัดการของห้องปฏิบัติการขยายยีน PCR อย่างเคร่งครัดบุคลากรในห้องปฏิบัติการต้องผ่านการฝึกอบรมอย่างมืออาชีพกระบวนการทดลองจะต้องดำเนินการอย่างเคร่งครัดในพื้นที่ต่างๆ (พื้นที่เตรียมรีเอเจนต์ พื้นที่เตรียมชิ้นงานทดสอบ พื้นที่ขยาย และพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์)วัสดุสิ้นเปลืองทั้งหมดจะต้องทิ้งหลังจากการฆ่าเชื้อเครื่องมือพิเศษ อุปกรณ์ และวัสดุสิ้นเปลืองในแต่ละขั้นตอนของการดำเนินการทดลองจะต้องไม่ถูกใช้งานร่วมกัน

2. โปรดเตรียมตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพสำหรับขั้นตอนการเตรียมสารและตัวอย่างควรใช้เสื้อโค้ทสำหรับห้องปฏิบัติการ ถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง และปิเปตเตอร์ในระหว่างการทดลอง

3. ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายน้ำยาซ้ำ ๆ เท่าที่จะทำได้ก่อนใช้งาน รีเอเจนต์จะต้องละลายให้หมดและหมุนเหวี่ยงที่ 8000 รอบต่อนาทีเป็นเวลาหลายวินาที

4. โปรดใส่ปิเปตที่ใช้ในพื้นที่เตรียมตัวอย่างลงในภาชนะที่มีสารฆ่าเชื้อและทิ้งพร้อมกับของเสียหลังการฆ่าเชื้อ

5. หลังการทดลอง โต๊ะทำงานและปิเปตเตอร์ได้รับการบำบัดด้วยไฮโปคลอไรต์ 10% หรือแอลกอฮอล์ 75% หรือหลอดอัลตราไวโอเลต

【การผลิต】

ชื่อ: มณฑลซานตง Xinda Gene Technology Co., Ltd

บริษัทในเครือของ Shandong Sinder Technology Co., Ltd

ที่อยู่: อาคาร B2 สวนอุตสาหกรรม Bandaohuigu ถนน Shungeng เมือง Zhucheng มณฑลซานตง

รหัสไปรษณีย์: 262233

โทรศัพท์: +86 - 0532 5882 0810